HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。其zui大優(yōu)點是在開放式培養(yǎng)或細胞觀察時能維持較恒定的PH值.在這種培養(yǎng)條件下,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中.大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色.HEPES有些昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒. 原則上,HEPES作為緩沖劑可用來代替碳酸氫鹽，以解除需要高濃度CO2培養(yǎng)環(huán)境的限制.實際操作中并非如此簡單. 溶解的CO2與碳酸氫鹽對良好的細胞生長也是很重要的。 
HEPES使用方法有兩種： 
(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 調pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10 mmol/L. 
(2)亦可配成 100 x 貯存液（l mol/L），使用前取 99ml培養(yǎng)液加入 lml貯存液，zui終應用濃度仍為10mmol/L。l mol/L（100 x）HEPES貯存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml雙蒸水中,用lN NaOH調pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.

本產(chǎn)品采用細胞培養(yǎng)級的HEPES原料，為已經(jīng)配好的1M溶液，無菌過濾?？梢灾苯邮褂?。